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J.Biomed.Mater.Res.:肝素-透明質酸納米纖維用于在脊髓修復中隔離生長因子

 
發布日期:2020-04-29     來源:易絲幫
 

DOI: 10.1002/jbm.a.36962

生長因子(GF)遞送是脊髓損傷修復的常見策略,但是,GF的降解會阻礙長期治療。眾所周知,通過肝素隔離GF可以保護遞送后的生物活性。研究者測試了兩種肝素修飾物,甲基丙烯酸肝素和巰基化肝素,并與甲基丙烯酸透明質酸(MeHA)進行靜電紡絲形成了HepMAHA和HepSHHA納米纖維。對于負載條件,將MeHA、HepMAHA和HepSHHA纖維與可溶性bFGF或NGF孵育,并用PBS沖洗。對照組在PBS中水合。在生長培養基或補充bFGF的培養基中培養24小時后,分析了L929成纖維細胞的增殖情況。在無血清培養基(SFM)或補充NGF的SFM(SFM+NGF)中培養三天后,測量解離的雞背根神經節神經突。在生長培養基中,與其他組相比,負載的HepMAHA中成纖維細胞增殖顯著增加(α<0.05)。在SFM中,與所有其他組相比,負載的HepMAHA的平均神經突長度最長。在SFM+NGF中,與MeHA相比,HepMAHA和HepSHHA的神經突長度增加,無論負載量如何(α<0.01),這表明可溶性NGF的主動隔離。HepMAHA是一種在脊髓損傷環境中隔離釋放GFs的有希望的生物材料,并且可以與GF填充的微球結合用于未來研究。

 

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圖1:電紡納米纖維的掃描電子顯微照片。A:MeHA,B:HepMAHA,C:HepSHHA。比例尺為10μm。顯微照片顯示,在不同類型的纖維中,具有類似結構的平滑定向納米纖維。D:顯示納米纖維濃度的表格。顯示三種纖維類型的納米纖維排列和纖維直徑。纖維排列是指在30度范圍內的纖維百分比,其中發現了纖維百分比最高的頻帶。纖維直徑是平均值±標準偏差。N=5個SEM圖像。(縮寫:納米,nm)


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圖2:在存在肝素修飾納米纖維的情況下,L929成纖維細胞的增殖,以alamarBlue的百分比減少表示;隨著細胞的增殖,alamarBlue試劑會減少,據報道可近似于細胞增殖。將負載的纖維暴露于100 ng/ml bFGF,然后在細胞培養之前用PBS漂洗7次。黑色誤差條表示標準偏差。A:在生長培養基中,負載的HepMAHA與所有其他條件顯著不同(*,p<0.05)。B:在補充FGF的培養基中,負載的HepMAHA與負載的HepSHHA顯著不同($,p<0.05)。

圖3:在存在肝素修飾納米纖維的情況下,用A:SFM和B:SFM+NGF培養的平均神經突長度。將負載的纖維暴露于100 ng/ml NGF,然后在細胞培養之前用PBS漂洗7次。誤差條表示標準偏差。*表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與所有其他條件顯著不同(p<0.01)。#表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與負載的MeHA顯著不同(p<0.01)。$表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與負載的HepSHHA顯著不同(p<0.01)。+表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與負載的HepMAHA顯著不同(p<0.01)。


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圖4:抗神經絲和FITC顯示的纖維上的突起延伸示例。所有圖像都遵循右上角的100μm比例尺。A至F是在SFM中生長的神經突。G到L是在SFM+NGF中生長的神經突。神經突在MeHA(A,G)、HepMAHA(B,H)、HepSHHA(C,I)、負載的MeHA(D,J)、負載的HepMAHA(E,K)、負載的HepSHHA(F,L)上生長。

鏈接地址:http://www.espun.cn/News/Detail/43253

文章來源:易絲幫

 
 
 

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